混合BAC基因文庫(kù)的建立與篩選目標(biāo)克隆技術(shù)取得進(jìn)展
BAC基因文庫(kù)無(wú)論是在植物還是動(dòng)物中是廣為應(yīng)用的一個(gè)工具，對(duì)基因克隆、基因組測(cè)序及功能基因組學(xué)研究中起了重要作用。在后基因組時(shí)代，BAC文庫(kù)對(duì)于基因克隆及有效保存遺傳材料仍有很大的實(shí)用價(jià)值。 傳統(tǒng)的BAC文庫(kù)建立一般需要將相關(guān)克隆一個(gè)一個(gè)置入至96孔或384孔板中保存，對(duì)于基因組的較大的生物則需要有較大的超低溫儲(chǔ)存空間， 同時(shí)其操作亦需要大型移液平臺(tái)（機(jī)器人）等條件?；旌?/span>BAC基因文庫(kù)（non-gridded BAC library）的制備相對(duì)較為簡(jiǎn)單，可節(jié)省大量的超低溫儲(chǔ)存空間，但是篩選目標(biāo)克隆是一個(gè)技術(shù)難題。本所大豆分子育種團(tuán)隊(duì)夏正俊研究員與日本生物資源研究所合作成功制備了一個(gè)大豆基因組5.2倍的混合BAC基因文庫(kù)，并建立一套集系統(tǒng)稀釋、PCR、多克隆混合挑取等實(shí)用技術(shù)為一起的目標(biāo)克隆快速篩選與回收技術(shù)。該技術(shù)理論上適用于所有物種的混合BAC基因文庫(kù)的篩選體系，有助于應(yīng)用技術(shù)手段來(lái)保存重要遺傳資源。
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Xia Z, Wu H, Watanabe S, Harada, K. 2013. Construction and targeted retrieval of specific clone from a non-gridded soybean BAC library Analytical Biochemistry. In Press. Available online 1 October 2013
Figure 2. 大豆混合BAC文庫(kù)(Non-gridded)的篩選程序
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